太子参RAPD反应体系的优化Optimization of the RAPD reaction system for Radix pseudostellariae
史辉;董晓菲;叶祖云;
摘要(Abstract):
为探讨太子参 RAPD-PCR 的最佳反应体系条件,通过单因子试验对影响太子参 RAPD-PCR 扩增效果的因素,如模板 DNA 浓度、Taq DNA 聚合酶浓度、d NTPs浓度、引物浓度、延伸时间和循环数进行优化 .确立可用于太子参 RAPD-PCR 分析最适宜的反应体系,即 20 μL 反应体系中含 28 ng 模板 DNA,0.7 U Taq 酶,0.8μmol·L(-1)引物,0.22 mmol·L(-1)引物,0.22 mmol·L(-1)d NTPs;PCR 扩增延伸时间为 100 s,循环数 40 次 . 稳定性试验表明,该体系能在不同太子参品种间扩增出清晰明亮、稳定性、多态性好的条带.优化后的体系可用于太子参种质资源的鉴定.
关键词(KeyWords): 太子参;RAPD;反应体系;单因子试验
基金项目(Foundation): 福建省自然科学基金项目(2016J01169);; 宁德师范学院科研发展资金项目(2020FZ05)
作者(Authors): 史辉;董晓菲;叶祖云;
DOI: 10.15911/j.cnki.35-1311/n.2022.01.019